4 ', 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride

保存條件 Store at -20℃, protect from light.DAPI基本信息：

　　級別/純度：BR，98%

　　CAS：28718-90-3

　　分子式： C16H15N5·2HCl

　　分子量： 350.25

　　MDL： MFCD00012681

4 ', 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride

DAPI性質：

　　1. 外觀：黃色粉末

　　2. 純度：≥95% （HPLC）

　　3. 產品描述：

　　DAPI是一種可對DNA 染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放藍色熒光。DAPI常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。盡管DAPI不能通過活細胞膜，但卻能穿透擾亂的細胞膜而對核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為360nm和460nm。

　　4. 染色過程

　　（1） 用1mL ddH2O將DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液（1mg DAPI/1mL H2O）。

　　注：DAPI不能直接用PBS等緩沖溶液溶解，需要先用水將其溶解。

　　（2） 取適量DAPI水溶液加到PBS中，制備成10～50µM的DAPI溶液。

　　推薦以下PBS的配制方法：

　　將8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4 溶解于1L純水中。

　　（3） 將1/10培養(yǎng)基體積的DAPI溶液加入到細胞培養(yǎng)基中。也可以用1/10濃度的DAPI緩沖液代替培養(yǎng)基。

　　（4） 在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。

　　（5） 用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

　　（6） 用帶有360nm激發(fā)波長，460nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。

　　儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

　　注意事項：

　　DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

　　熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

　　為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。